Terapia génica con células inmunomiméticas diseñadoras que protegen a los ratones de la infección por SARM

Se diseñó una red de genes de ciclo cerrado que programa células de mamíferos para detectar y eliminar infecciones bacterianas de manera autónoma. El circuito genético contiene receptores tipo Toll humanos como el sensor bacteriano y un promotor sintético que conduce a la expresión reversible y ajustable de la lisostafina, una enzima bacteriolítica altamente letal para S. aureus.. 
Los resultados que sugieren podrían ofrecer un enfoque terapéutico para la detección temprana, la prevención y la curación de las infecciones patogénicas en la era posterior a los antibióticos.

Información: https://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(18)30651-2

Progenitores epicárdicos derivados de células madre pluripotentes humanas pueden diferenciarse a células endoteliales de tipo endocardíaco

Mediante la generación de líneas celulares hPSC knock-in CDH5-2A-eGFP a partir de células madre primarias o pluripotentes humanas (hPSC)  y la diferenciación en células epicárdicas WT1 más tratamiento con VEGF in vitro, se logró obtener células endoteliales que tienen la capacidad de formar endotelio endocárdico durante el desarrollo y tener implicaciones para la regeneración del corazón y la ingeniería del tejido cardíaco.

Más información: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5675097/

ADN Recombinante

ADN Recombinante en la naturaleza: CONJUGACIÓN BACTERIANA
La conjugación bacteriana es el proceso de transferencia de información genética desde una célula donadora a otra receptora, promovido por determinados tipos de plásmidos, y que requiere contactos directos entre ambas, con intervención de estructuras superficiales especializadas y de funciones específicas.

https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/18conjuga.htm

ADN Recombiante artificial: VACUNA CONTRA EL VIRUS DE LA GRIPE A Y EL STAPHYLOCOCCUS AUREUS.
El S. aureus es uno de los principales agentes bacterianos para el desarrollo de endocarditis infecciosa. Esta vacuna de ADN  desarrollada expresa la proteína de fusión Ag85A-HA2 y se ha demostrado que Ag85A puede regular la expresión de TLR2 y que la activación inmune ofrece protección contra S. aureus. Se formuló entonces la hipótesis de que las reacciones inmunes a Ag85A podrían ser capaces de eliminar esta bacteria.

https://virologyj.biomedcentral.com/articles/10.1186/1743-422X-10-40

Western Blotting for Staphylococcus aureus AgrA

Staphylococcus aureus tiene un sistema de detección de quórum para regular la expresión de diversos factores de virulencia, que es ejercido por el locus agr que codifica agrBDCA y un ARN regulador llamado RNAIII.
La expresión del locus Agr se ha examinado en profundidad a nivel transcripcional, pero las investigaciones de expresión traduccional son limitadas, porque la IgG utilizada para detectar una proteína específica reacciona altamente a la proteína A de S. aureus.
Aunque este es un protocolo específico para Western Blotting de la proteína AgrA de S. aureus, también se puede usar para otras proteínas de S. aureus usando el anticuerpo apropiado.

Aquí presentamos un método para detectar AgrA: https://bio-protocol.org/e1071

Caracterización del gen mecA de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina aislados de tres grupos poblacionales de la ciudad de Medellín

T: Caracterización del gen mecA de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina aislados de tres grupos poblacionales de la ciudad de Medellín.
O: Caracterizar fenotípicamente la resistencia a meticilina y genotípicamente el casete cromosomal SSCmec en cepas de S. aureus aislados de individuos de la ciudad de Medellín mediante PCR múltiple.
M: Secreciones, sangre, orina, líquido peritoneal, hueso, herida quirúrgica.
AN: ADN genómico bacteriano.
G: 
Gen mecA: 967 pb.
Gen SSCmec:
Locus A: 495 pb.
Locus B: 284 pb.
Locus C: 209 pb.
Locus D: 342 pb.
Locus E: 243 pb.
Locus F: 414 pb.
PCR: 
-PCR convencional: amplificación del gen mecA.
35 ciclos:

• D: 95°C x 1min.
• H: 57°C x 1min.
• E:  70°C x 45 seg.

-PCR múltiplex: tipificación del complejo SSCmec.
30 ciclos:

• D: 94°C x 30 seg.
• H: 54°C x 30 seg.
• E: 94°C x 1 min.

V: Electroforesis en un gel de agarosa al 2%.
EA: Gen mecA: 92% - Gen SSCmec: 98%

Artículo: https://ac.els-cdn.com/S0123939213701656/1-s2.0-S0123939213701656-main.pdf?_tid=085a257d-bb20-4053-bd77-c8d733d3adf4&acdnat=1528120743_312dd22f00cc92164dc544c70df96b22

S. Aureus: Prueba de tamizaje y prueba confirmatoria

PRUEBA DE TAMIZAJE

Ecocardiografía transesofágica (ETE) recomendado en válvulas protésicas, para el resto se realiza Ecocardiografía transtorácica (ETT) como primer procedimiento para el diagnóstico de vegetaciones que aparecen como una masa ecogénica sésil o pediculada, adherida generalmente a la superficie de un velo valvular que muestra un típico registro en modo M definido como velloso “en cepillo”.

PRUEBA CONFIRMATORIA

La aplicación de la combinación de la PET-TC en el diagnóstico de la endocarditis infecciosa valvular protésica asociada a dispositivos intracardíacos mejora hasta el 93% la catalogación de las endocarditis (por confirmación o rechazo) y facilita su diagnóstico. 

El uso de la PET-TC, que está sincronizada con el electrocardiograma, en enfermos portadores de prótesis valvulares y dispositivos intracardíacos, permite estudiar el estado de las válvulas cardíacas protésicas, tanto en lo que se refiere al metabolismo glicídico (18F-FDG), indicador de infección, como por el detalle anatómico de la angioTC cardíaca sincronizado.

Más información: 

• http://biotech-spain.com/es/articles/el-uso-de-la-pet-tc-mejora-hasta-un-90-el-diagn%C3%B3stico-de-la-endocarditis-infecciosa-en-pacientes-con-v%C3%A1lvulas-prot%C3%A9sicas-y-dispositivos-intracard%C3%ADacos-/
• http://www.ecoccur.es/capitulo-15-ecocardiografia-en-la-endocarditis-infecciosa/

Endocarditis causada por Staphylococcus aureus: Epigenómica

La persistencia es un estado fisiológico epigenético de una fracción de células genéticamente total al inóculo, que permite a dicha fracción minoritaria evadir el efecto letal de los antimicrobianos y sobrevivir a su acción.

La resistencia a la meticilina (S. aureus resistente a la meticilina, SARM) está mediada por la adquisición del gen mecA de origen cromosómico. La resistencia a la vancomicina en altos niveles se presenta por la adquisición de grupos de genes vanA productores de precursores de peptidoglucano (terminados en D-Ala-D-Lac) con reducida afinidad por el antibiótico. La resistencia a la daptomicina se debe a alteraciones en la membrana celular que se han asociado a proteínas implicadas en el metabolismo de lípidos (PgsA y Cls) y en el mantenimiento de su carga (MprF y sistema Dlt) y al efecto de sistemas reguladores que orquestan la respuesta al estrés de la envoltura celular (YycFG, VraSR). La resistencia al linezolid se explica por mutaciones en la subunidad V del ARNr 23S, sustituciones de aminoácidos en las proteínas ribosómicas L3 y L4 y metilación del ARNr por la enzima Cfr.

Más información:

• https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4435674/
• https://books.google.com.ec/books?id=dQ_njG9c1B4C&pg=PA64&lpg=PA64&dq=expresion+epigenetica+endocarditis&source=bl&ots=suS2XUOyHO&sig=qgYI4X9Jj0uwm8ibh3ezo1eF5qc&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwiDp4PJmZLbAhUQyVMKHUWZC9AQ6AEIYTAE#v=onepage&q=expresion%20epigenetica%20endocarditis&f=false